丁酰苷菌素生物合成酶基因的分子克隆：Ⅰ.重组质粒No.2和...

来源 :中国医学科学院学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户：cs19890126

【摘要】

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环状芽孢杆菌B.circulans NRRL-B 3312是丁酰苷菌素的产生菌。用鸟枪法克隆其抗生素生物合成关键酶——α-羟基-γ-氨丁酰酰化酶基因。用EcoR Ⅰ分别酶切其染色体DNA和pUB110

【作者】

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李元石莲英刘伯英王硕昌

【机构】

：

中国医学科学院医药生物技术研究所,中国医学科学院医药生物技术研究所北京,北京,北京

【出处】

：

中国医学科学院学报

【发表日期】

：

1989年1期

【关键词】

：

抗生素丁酰苷菌素基因克隆质粒 shotgun cloning recombinant plasmid DNA antibiotics resistance

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环状芽孢杆菌B.circulans NRRL-B 3312是丁酰苷菌素的产生菌。用鸟枪法克隆其抗生素生物合成关键酶——α-羟基-γ-氨丁酰酰化酶基因。用EcoR Ⅰ分别酶切其染色体DNA和pUB110质粒,经T4-DNA连接酶连接,转化至枯草芽孢杆菌B.subtilis 168的感受态细胞,以卡那霉素抗性标记挑选转化子。其中,No.2和No.11重组质粒对卡那霉素和新霉素的抗性较pUB110有所提高.构建了这两种重组质粒的限制性内切酶图谱。分子杂交实验确证,两个重组质粒DNA中均有B.circulans

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