【摘 要】
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为阐明开花负调因子BjSVP(源于种子春化型作物芥菜)与BoFLC(源于绿体春化作物甘蓝)异源聚合后在开花调控路径中的互作机制,从芥菜酵母重组质粒pGADT7-BjSVP分别亚克隆含MI、M
【机 构】
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西南大学园艺园林学院,南方山地园艺学教育部重点实验室,重庆市蔬菜学重点实验室,
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为阐明开花负调因子BjSVP(源于种子春化型作物芥菜)与BoFLC(源于绿体春化作物甘蓝)异源聚合后在开花调控路径中的互作机制,从芥菜酵母重组质粒pGADT7-BjSVP分别亚克隆含MI、MIK、K、IKC、KC、IK、IK1L1K2L2、IK1L1K2、IK1L1、IK1、I结构域的11个SVP截短体(BjSVPΔ1~BjSVPΔ11),构建猎物质粒pGADT7-BjSVPΔ1~pGADT7-BjSVPΔ11并转化酵母Y187菌;从甘蓝中克隆了BoFLC和BoFLCzq基因,构建诱饵质粒pGBKT7-BoFLC、pGBKT7-BoFLCzq并转化酵母Y2HGold菌。酵母双杂交表明:芥菜BjSVP能与甘蓝BoFLC相互作用,在QDO/X/A培养基上长出蓝色菌落,激活酵母报告基因AUR1-C、HIS3、ADE2、MEL1。截短体BjSVPΔ2~BjSVPΔ5也能与BoFLC相互作用,而BjSVPΔ7~BjSVPΔ11不能与BoFLC互作。由此表明BjSVP完整的K域(BjSVP3)可独立作用于BoFLC,但K域亚域(K1、K2、K3)或者连接区(L1、L2)缺失突变后不能介导该作用。作用强度分析表明:BjSVP的I域能增强该蛋白互作,但M域和C域可能会干扰该作用;芥菜BjFLC被甘蓝BoFLC或BoFLCzq替换后,可明显增加作用强度;甘蓝FLC的I域第20位、K域第65位和C域第32位氨基酸的变异很可能与作用强度相关。
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