【摘 要】
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目的:应用一种简易、快速的复合PCR扩增系统检测间日疟原虫(P.v)及混合感染.方法:以间日疟原虫和恶性疟原虫(P.f)小亚单位核糖体核糖核酸基因(SSUrDNA)特定片段为靶基因,设计
【机 构】
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第四军医大学病原生物学教研室西京医院输血科,西安,710032;
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目的:应用一种简易、快速的复合PCR扩增系统检测间日疟原虫(P.v)及混合感染.方法:以间日疟原虫和恶性疟原虫(P.f)小亚单位核糖体核糖核酸基因(SSUrDNA)特定片段为靶基因,设计并合成引物,建立复合PCR扩增系统.采用煮沸法快速制备DNA模板研究该系统的敏感性和特异性,并用于临床血样的检测.结果:从间日疟原虫和恶性疟原虫感染血样中分别扩增出分子量大小为705 bp和575 bp的特定扩增带.而食蟹猴疟原虫、诺氏疟原虫及正常人血样均无扩增带出现.单独检测P.v敏感度达到0.15×10-5(约7个原虫/μl全血),在P.f存在的情况下检测P.v敏感度为0.15×10-4.检测132例疟区门诊病人冻存血标本,104份与镜检法结果相同.并发现14份混合感染和5份为镜检虫种鉴别失误.结论:该系统敏感性高,特异性强,操作简单,并可在一次扩增中同时检出间日疟原虫和恶性疟原虫,具有一定的推广应用价值.
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