【摘 要】
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[目的]研究β-伴大豆球蛋白通过核因子-κB(NF-κB)、诱导型一氧化氮合酶(iNOS)、c-Jun N端激酶(JNK)和p38丝裂原活化蛋白激酶(p38 MAPK)信号通路对猪肠上皮细胞(IPEC-J2)造成损伤的差异,为探索β-伴大豆球蛋白引发仔猪肠道黏膜损伤的分子机制提供理论依据.[方法]采用β-伴大豆球蛋白体外诱导IPEC J2损伤,试验设对照组T0(猪肠上皮细胞不做处理),试验组T1(加入5 mg/mL β-伴大豆球蛋白)、T2(加入5 mg/mL β-伴大豆球蛋白+1 μmol/L NF-κ
【机 构】
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安徽农业大学动物科技学院,安徽合肥230036
【出 处】
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西北农林科技大学学报（自然科学版）
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[目的]研究β-伴大豆球蛋白通过核因子-κB(NF-κB)、诱导型一氧化氮合酶(iNOS)、c-Jun N端激酶(JNK)和p38丝裂原活化蛋白激酶(p38 MAPK)信号通路对猪肠上皮细胞(IPEC-J2)造成损伤的差异,为探索β-伴大豆球蛋白引发仔猪肠道黏膜损伤的分子机制提供理论依据.[方法]采用β-伴大豆球蛋白体外诱导IPEC J2损伤,试验设对照组T0(猪肠上皮细胞不做处理),试验组T1(加入5 mg/mL β-伴大豆球蛋白)、T2(加入5 mg/mL β-伴大豆球蛋白+1 μmol/L NF-κB抑制剂二硫氨基甲酸肽吡咯烷(PDTC))、T3(加入5 mg/mL β-伴大豆球蛋白+1μmol/L iNOS抑制剂Nω-硝基-L-精氨酸甲酯(L-NAME))、T4(加入5 mg/mL β-伴大豆球蛋白+1μmol/L JNK抑制剂SP600125)和T5(加入5 mg/mL β-伴大豆球蛋白+1 μmol/L p38抑制剂SB202190),处理24 h后观察细胞结构,测定各组细胞活性及细胞因子NO、TNF-α、IL-10、IFN-γ含量,细胞损伤相关基因NF-κBp65、iNOS、JNK、p38及其编码蛋白的表达水平.[结果]在IPEC-J2中加入5 mg/mL β-伴大豆球蛋白24 h后,细胞数量减少,线粒体改变,染色质边集,细胞活性显著下降(P＜0.05),NO、TNF-α、IFN-γ含量均极显著增加(P＜0.01),而IL-10含量极显著减少(P＜0.01),NF-κB p 65、iNOS、JNK和p38 mRNA表达水平极显著升高(P＜0.01),NF-κB、iNOS、JNK、p38蛋白表达量极显著上升(P＜0.01);加入抑制剂后,细胞活性显著提高(P＜0.05),细胞结构趋于完整和规则,IL-10含量极显著增加(P＜0.01),而NO、TNF-α、IFN γ含量极显著减少(P＜0.01),NFκBp65、iNOS、JNK和p38 mRNA及其编码蛋白表达受到抑制.其中T2组细胞活性显著高于T3、T4、T5组(P＜0.05),细胞数量、形态和完整性最接近对照组细胞.[结论]β-伴大豆球蛋白主要通过NF-κB/iNOS信号通路对IPEC-J2造成损伤,PDTC对这种损伤作用的抑制效果最好.
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