甜蛋白Monellin基因在大肠杆菌中的高效表达

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根据已报道的单链monellin甜蛋白的氨基酸序列,采用细菌偏爱密码子,人工合成了全长294bp的monellin基因.插入到大肠杆菌表达载体pET-22b中,构建重组分泌型表达载体pETMO.经IPTG诱导pETMO所含有的甜蛋白基因可在大肠杆菌BL21(DE3)中高效表达,表达量占菌体可溶性蛋白的44.8%.且经纯化后测定其甜度是蔗糖的3000倍.得到的甜蛋白热稳性及耐酸性均比天然产物有所提高.
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