5-氮胞苷诱导大鼠骨髓间充质干细胞向心肌样细胞分化及黄芪甲苷的协同作用

来源 :中国组织工程研究 | 被引量 : 0次 | 上传用户:a673897736123
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背景:大多学者使用5-氮胞苷作为诱导剂诱导骨髓间充质干细胞向心肌细胞定向分化.目的:观察联合应用黄芪甲苷及5-氮胞苷诱导骨髓间充质干细胞向心肌细胞定向分化中心肌细胞相关受体的表达.方法:选用生长良好的第3 代骨髓间充质干细胞,分为4 组.Ⅰ组:仅更换L-DMEM 培养液;Ⅱ组:100 mg/L 黄芪甲苷+5 μmol/L 5-氮胞苷诱导24h 后,更换L-DMEM 培养液.Ⅲ组:10 μmol/L 5-氮胞苷孵育24h 后,更换L-DMEM 培养液;Ⅳ组:5 μmol/L 5-氮胞苷孵育24 h 后,更换L-DMEM 培养液.各组均每3 d 换液1 次,诱导30 d 后对分化细胞进行鉴定.结果与结论:①Ⅲ组、Ⅳ组及Ⅱ组诱导后细胞心肌细胞特异性蛋白Nkx2.5 、cTnT 及Desmin 的表达均为阳性,与Ⅰ组比较,差异有非常显著性意义(P < 0.01).Ⅱ组及Ⅲ组诱导后2 周,镜下见cTnT 、Desmin 表达数量高于Ⅳ组(P < 0.01).Nkx2.5 在两组表达亦高于Ⅳ组,其中Ⅱ组与Ⅳ组比较,差异有极显著性意义(P < 0.01),Ⅲ组与Ⅳ组比较,差异有显著性意义(P < 0.05).Ⅰ组无上述蛋白的阳性表达.②诱导后2 周,镜下可见Ⅱ组、Ⅲ组细胞出现心肌细胞样的节律性跳动,证明部分细胞在诱导因素的作用下,已向心肌细胞分化.结果表明用100 mg/L 黄芪甲苷+5 μmol/L 5-氮胞苷联合诱导可产生与10 μmol/L 5-氮胞苷相似的诱导效果,这可能与黄芪甲苷对细胞具有保护作用,促血管内皮细胞增殖作用,增强细胞对5-氮胞苷细胞毒性的耐受,上调心肌特异性蛋白的表达有关.
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