本文建立了一种灵敏、高效的LC-MS/MS分析方法测定家兔血浆中二氟可龙的浓度,并应用于戊酸二氟可龙乳膏经皮给药后家兔体内活性代谢物二氟可龙的血浆药动学研究。以乙氧苯柳胺为内标,血浆样品经过乙酸乙酯提取后,通过Zorbax Eclipse XDB-C18 （50 mm×4.6 mm, 5μm）色谱柱分离,以50%乙腈-甲醇溶液和5 mmol·L^-1甲酸铵-0.1%甲酸-5%甲醇水溶液作为流动相进行梯度洗脱;在电喷雾离子化源（ESI）正离子检测条件下,采用多反应离子监测模式（MRM）进行定量分析,检测的离子对分别为[M+H]+m/z 395.2→m/z 355.2 （二氟可龙）,[M+H]+m/z 258.1→m/z 120.9 （内标）。二氟可龙在0.01～10 ng·mL^-1内线性良好,低、中、高浓度质控样品的准确度平均值在92.7%～97.0%之间,批内、批间精密度分别为4.33%～7.40%和2.27%～7.63%之间。采用该分析方法测定戊酸二氟可龙乳膏经皮给药0.01 g·cm-2后兔血浆中活性代谢物二氟可龙的浓度,计算得出的主要药代学参数tmax、Cmax、AUC0-72 h、t1/2分别为（6.33±1.21） h、（0.168±0.080 0） ng·mL^-1、（3.15±0.834） h·ng·mL^-1、（32.0±17.4） h。本研究中动物实验方案已获得天津药物研究院新药评价有限公司实验动物管理与使用委员会的批准。