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目的
检测降钙素基因相关肽基因(CGRP)和沉默过氧化物酶体增殖子活化受体-γ(PPARγ)共转染NIH3T3成纤维细胞中的表达。
方法培养NIH3T3成纤维细胞，收集细胞随机分为五组，正常组：正常培养细胞，不做特殊处理，作为正常对照；空载体组：仅用空载体pGFP-V-RS质粒转染细胞，作为阴性对照组；CGRP组：用重组载体pGFP-V-RS-exCGRP质粒转染细胞；siPPARγ组：用重组载体pGFP-V-RS-siPPARγ质粒转染细胞；双基因组：用重组双基因载体pGFP-V-RS-siPPARγ-exCGRP质粒转染细胞。电转染成功后，继续培养细胞48 h，采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)与蛋白质免疫印迹法(Western blot)分别检测各组细胞内PPARγ、CGRP mRNA与蛋白的表达。
结果双基因组中CGRP基因呈高表达，明显高于正常组、空载体组、siPPARγ组，差异均有统计学意义(P<0.05)；与CGRP组中CGRP基因表达量相近，差异未见统计学意义(P>0.05)。双基因组细胞中PPARγ基因呈低表达，明显低于正常组、空载体组、CGRP组，差异均有统计学意义(P<0.05)；与siPPARγ组细胞中PPARγ基因表达量相似，差异未见统计学意义(P>0.05)。
结论促进成骨基因和抑制成脂基因共转染NIH3T3成纤维细胞，能够上调细胞中CGRP基因表达，同时下调PPARγ基因表达。