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目的 探讨维甲酸(RA)诱导胚胎干细胞(ESC)向神经细胞定向分化及自由分化过程中,Notch1蛋白和mRNA的时空表达以及RA对Notch1表达的影响.方法实验分两组:实验组用RA对ESC进行神经细胞定向诱导分化,对照组ESC进行自由分化.各组分别取ESC分化1、3、5、7、9d的细胞,倒置显微镜观察形态变化,免疫荧光观察MAP-2表达,免疫细胞化学、流式细胞术及RT-PCR检测Notch1蛋白和mRNA表达.结果实验组诱导分化的神经元逐渐增多并形成神经网络.对照组以圆形上皮样分化细胞为主.ESC Notch1蛋白及mRNA均为高表达,诱导分化或自由分化后蛋白表达降低(P<0.05).实验组Notch1 mRNA水平下降(P<0.05),对照组则无明显变化(P>0.05).分化3d后,实验组各时间点Notch1的表达水平均低于对照组(P<0.05).结论ESC分化时伴有Notch1信号的关闭.Notch1可能对ESC向神经元的特异性分化起重要作用.促进Notch1的下调可能是RA诱导分化的机制之一。