【摘 要】
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研究果蝇的心脏发育基因表达调控机制,其相应靶点的抗体必不可少。但目前市场上缺乏此类商用抗体,因此本研究选择果蝇心脏发育中的标记基因Svp(Seven-up),并采用DNA免疫技术
【机 构】
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湖南师范大学生命科学学院心脏发育研究中心
【基金项目】
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国家自然科学基金项目(81370451),湖南省科技计划重点项目(2015DK3001)
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研究果蝇的心脏发育基因表达调控机制,其相应靶点的抗体必不可少。但目前市场上缺乏此类商用抗体,因此本研究选择果蝇心脏发育中的标记基因Svp(Seven-up),并采用DNA免疫技术来快速制备其抗体。首先通过聚合酶链式反应(PCR)扩增出Svp基因编码区部分序列,然后将其连接到真核表达载体pCAGGS-P7上,再将重组质粒pCAGGS-P7-Svp直接注射进小鼠体内,使外源基因在活体内表达,产生的抗原激活了小鼠的特异性细胞免疫和体液免疫,从而分泌相应的抗体,取小鼠的血清收集获得抗体。最后用蛋白质印迹(West
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