【摘 要】
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目的 探究骨髓间充质干细胞（BMSCs）对慢性髓细胞性白血病K562细胞衰老的作用及Raf/MEK/ERK信号通路的影响。方法 从30只6～8周SPF级、体重20～30 g的C57BL/6J雄性小鼠骨髓中分离BMSCs，采用流式细胞术检测其表面抗原CD29、CD244、CD45的表达，使用成脂、成骨分化诱导液诱导后，采用油红O、茜素红染色鉴定其分化能力。将BMSCs与K562细胞按1∶4、1∶2、
【基金项目】
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国家自然科学基金资助项目（81860038、81660731）；
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目的 探究骨髓间充质干细胞（BMSCs）对慢性髓细胞性白血病K562细胞衰老的作用及Raf/MEK/ERK信号通路的影响。方法 从30只6～8周SPF级、体重20～30 g的C57BL/6J雄性小鼠骨髓中分离BMSCs，采用流式细胞术检测其表面抗原CD29、CD244、CD45的表达，使用成脂、成骨分化诱导液诱导后，采用油红O、茜素红染色鉴定其分化能力。将BMSCs与K562细胞按1∶4、1∶2、1∶1、2∶1的比例分别培养24、48、72 h，选择K562细胞增殖率最低的共培养时间及细胞比例作为BMSCs组，常规培养的K562细胞作为对照组进行后续实验。采用SA-β-Gal染色检测两组细胞衰老情况，Western blot检测两组p16INK4a、p-Raf、p-MEK、p-ERK蛋白的表达情况。结果 BMSCs表面标志物CD29、CD44、CD45的阳性表达率分别为89.18%、87.65%、1.16%，其在体外成功分化为脂肪细胞和骨细胞。BMSCs∶K562细胞比例为1∶2、1∶1、2∶1时，共培养各时间点的K562细胞增殖率均低于同一时间点的对照组，比例为2∶1时各时间点的K562细胞增殖率均低于同一时间点的1∶2、1∶1（P ＜0.05）。BMSCs∶K562细胞比例为2∶1时，共培养48 h后K562细胞增殖率均低于共培养24、72 h后（P ＜0.05）。BMSCs组衰老细胞阳性率及p16INK4a蛋白表达水平均高于对照组，p-Raf、p-MEK、p-ERK蛋白表达水平均低于对照组（P ＜0.01）。结论 BMSCs可诱导K562细胞衰老，其作用机制可能与Raf/MEK/ERK信号通路有关。
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