【摘 要】
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为研究佛波酯(PMA)和胰岛素在蛋白质合成中的信号传递,应用激酶活性测定和Western印迹等方法,分别检测mTOR(mammalian target of rapamycin) 特异性抑制剂rapamycin或磷脂酰
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为研究佛波酯(PMA)和胰岛素在蛋白质合成中的信号传递,应用激酶活性测定和Western印迹等方法,分别检测mTOR(mammalian target of rapamycin) 特异性抑制剂rapamycin或磷脂酰肌醇-3激酶(PI3K)的特异性抑制剂LY294002预处理、PMA或胰岛素处理的血清饥饿的中国仓鼠肺成纤维细胞(CHL)中p70 S6激酶(p70 S6K)和蛋白激酶B(PKB)的活性及表达.结果显示,PMA或胰岛素刺激促进p70 S6K的活化和表达.而rapamycin预处理可阻断PMA和胰岛素对p70 S6K的激活作用,表明PMA和胰岛素可能是通过mTOR-依赖性途径激活p70 S6K.结果还显示,胰岛素刺激促进PKB的活化和表达,而PMA对PKB的活性和表达无影响.LY294002预处理可阻断胰岛素对p70 S6K和PKB的激活作用,但不能抑制PMA刺激引起的p70 S6K的活化.表明胰岛素和PMA介导p70 S6K活化的信号途径有所不同,胰岛素介导p70 S6K的活化可能依赖于PI3K途径,而PMA介导p70 S6K的活化不通过PI3K途径.
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