目的 观察肾小管上皮细胞转分化过程中PTEN的表达和分布,并研究上调DJ-1对PTEN表达和分布及PI3K-Akt通路活化的影响.方法 以人肾小管上皮细胞为研究对象,10 μg/L TGF-β1刺激72 h诱导人肾小管上皮细胞转分化;Western印迹法检测正常组和TGF-β1干预组细胞内PTEN、E-cadherin和α-SMA蛋白表达;RT-PCR法检测两组细胞内PTEN mRNA表达水平.脂质体法介导pEGFP-N1-DJ-1或空载体转染人肾小管上皮细胞,倒置荧光显微镜和Western印迹鉴定转染效率后,Western印迹法检测正常组、pEGFP-N1-DJ-1转染组和空载体转染组细胞内PTEN蛋白表达;RT-PCR法检测各组细胞内PTEN mRNA表达.pEGFP-N1-DJ-1转染前1 h用PI3K抑制剂LY294002预处理,Western印迹检测正常组、pEGFP-N1-DJ-1转染组和空载体转染组及LY294002预处理1 h后pEGFP-N1-DJ-1转染组的p-Akt和Akt蛋白的表达.激光共聚焦显微镜下观察正常组、TGF-β1干预组和pEGFP-N1-DJ-1转染组细胞内PTEN蛋白的分布.结果 正常组细胞表达E-cadherin和PTEN,几乎不表达α-SMA;TGF-β1干预组α-SMA表达显著高于正常组(P＜0.05),而E-cadherin表达显著低于正常组(P＜0.05),PTEN mRNA和蛋白表达均显著低于正常组(P＜0.05).pEGFP-N1-DJ-1和空载体转染后,细胞绿色荧光表达均在80%以上;pEGFP-N1-DJ-1转染组细胞内DJ-1表达显著高于正常组(P＜0.05),而PTEN mRNA和蛋白表达均显著低于正常组(P＜0.05);pEGFP-N1-DJ-1转染组p-Akt表达显著高于正常组(P＜0.05),但经LY294002干预后与正常组表达基本一致.正常组细胞内PTEN分布于细胞质和细胞核;TGF-β1干预组细胞质内PTEN几乎完全消失,而细胞核PTEN略有增加;pEGFP-N1-DJ-1转染组细胞核表达PTEN,但细胞质几乎无PTEN表达,这与TGF-β1干预组相似.结论 肾间质纤维化中高表达DJ-1可抑制VFEN表达,并促进PI3K-Akt通路活化。
肾间质纤维化中DJ-1抑制抗纤维化因子PTEN的表达
【摘 要】
：
目的 观察肾小管上皮细胞转分化过程中PTEN的表达和分布,并研究上调DJ-1对PTEN表达和分布及PI3K-Akt通路活化的影响.方法 以人肾小管上皮细胞为研究对象,10 μg/L TGF-β1刺激72 h诱导人肾小管上皮细胞转分化;Western印迹法检测正常组和TGF-β1干预组细胞内PTEN、E-cadherin和α-SMA蛋白表达;RT-PCR法检测两组细胞内PTEN mRNA表达水平.脂
【机 构】
：
430030,武汉,华中科技大学同济医学院附属同济医院肾内科,430030,武汉,华中科技大学同济医学院附属同济医院肾内科,430030,武汉,华中科技大学同济医学院附属同济医院肾内科,430030,
【出 处】
：
中华肾脏病杂志
【发表日期】
：
2009年25期
论文部分内容阅读
其他文献
随着中国经济的发展,科技的进步,社会的变化,人们的日常生活受到了广泛的影响,在思维方式、价值观念与认知途径等方面都发生了非常深刻的变化.日新月异的社会变化与变革,对中
从计算声场景思想出发，研究了如何从混叠语音中提取各源信号基音及谐波分量的方法，在此基础上根据语音信号正弦模型重建各语音分量，从而实现混叠语音分离。实验结果表明，笔者提出
在斜距多普勒定位模型和高精度GPS轨道数据的基础上,提出了一种稀疏控制点(只需要3个控制点)的修轨算法,从而实现高精度星载SAR图像几何校正。该方法通过简化轨道参数模型,减少控制点数量,在保证校正精度的基础上,提高了算法效率。
近年来,新课改进程日渐深入,素质教育得到社会广泛关注.处于这种大环境中,想要帮助学生夯实语文基础,为其今后学习和成长带来正确指导,必须及时转变语文教学模式,增强学生作
A number of involve in the Shandong University of Technology, there has been a kind of time waste and inefficiency phenomenon in the English teaching of these
该文从挂篮荷载计算、施工流程、支座及临时固结施工、挂篮安装及试验、合拢段施工、模板制作安装、钢筋安装、混凝土的浇筑及养生、测量监控等方面人手,介绍了S226海滨大桥
许多企业已将溢漏率降到 0 .1 %以下。据部分企业报表显示 ,2 0 0 1年武钢第三炼钢厂 2台板坯连铸机仅 0 .0 2 5 % ,天钢、临钢板坯连铸机和重钢七厂 3号方坯连铸机仅 0 .0 3
期刊
讨论并实现了基于３Ｄ－ＳＰＩＨＴ算法的三维小波视频编码方法。该方法建立在真三维小波分解基础上，通过定义一种新的时空方向树结构，实现了静止图像ＳＰＩＨＴ算法的三维扩展。该方法不涉及运动估计，具有
该文从挂篮荷载计算、施工流程、支座及临时固结施工、挂篮安装及试验、合拢段施工、模板制作安装、钢筋安装、混凝土的浇筑及养生、测量监控等方面人手,介绍了S226海滨大桥