【摘 要】
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目的 探讨LYN对胃癌细胞迁移、侵袭等生物学行为的影响,并分析其对Wnt/β-catenin信号通路的调控机制.方法 选取2017年10月-2018年5月承德医学院附属医院收治的胃癌患者的胃
【机 构】
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承德医学院附属医院胃肠外科 067000;承德医学院附属医院麻醉科 067000;首都医科大学附属北京友谊医院普外科 100050
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目的 探讨LYN对胃癌细胞迁移、侵袭等生物学行为的影响,并分析其对Wnt/β-catenin信号通路的调控机制.方法 选取2017年10月-2018年5月承德医学院附属医院收治的胃癌患者的胃癌组织和癌旁组织样本,采用qRT-PCR检测在临床收集的胃癌和癌旁组织样本中的LYN表达水平.以胃癌AGS细胞为实验对象,利用脂质体Lipofectamine2000将shRNA-LYN转染至胃癌AGS细胞中作为实验组(sh-LYN组),未转染细胞为对照组(NC组).qRT-PCR检测转染前后AGS细胞中LYN mRNA表达情况.Transwell检测细胞的迁移和侵袭;TUNEL检测细胞凋亡;蛋白印迹分析(Western Blot)检测Wnt/β-catenin信号通路相关蛋白,对其调控机制进行研究.计量资料以均值±标准差(Mean± SD)表示,两组间比较采用独立样本t检验.P＜0.05为差异具有统计学意义.结果 LYN mRNA表达在胃癌组织中被显著上调(t=11.04,P＜0.001);sh-LYN转染胃癌细胞可使LYN蛋白的表达量低于正常对照组(F = 961.26,P =0.016);转染后,sh-LYN组细胞的迁移、侵袭受到抑制(t = 3.437、4.450,P= 0.011、0.026),转染后sh-LYN组细胞的凋亡率显著高于正常对照组(t =6.482,P = 0.003);Western Blot检测结果:相比于正常对照组,sh-LYN敲低LYN的表达之后,可显著降低Wnt3 和β-catenin的表达.下游蛋白的检测发现LYN敲低后,EMT上皮标记E-钙黏蛋白(E-cadherin)的表达增加,EMT间充质标记N-钙黏蛋白(N-cadherin),波形蛋白(vimentin)表达则下调,相关蛋白锌指蛋白1(Snail1)和锌指蛋白2(Snail2)表达也下调.结论 敲低LYN可抑制胃癌细胞的迁移和侵袭,并诱导胃癌细胞凋亡,其过程与Wnt/β-catenin信号通路有关.
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