猪繁殖与呼吸综合征病毒BD株的分离及GP4基因的克隆

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从河北保定分离到一株疑似猪繁殖与呼吸综合征病毒,接种Marc-145细胞,经过两代盲传后,出现细胞病变,经鉴定为PRRSV,命名为BD株。根据GenBank公布的PRRSV JXA1株ORF4基因的核苷酸序列,设计并合成一对特异性引物,用RT-PCR方法扩增完整ORF4基因,将扩增产物连接到pMD19-T载体并转化克隆菌,将阳性重组质粒PMD-GP4进行测序分析。应用DNA St ar软件,将测序结果与国内外已发表毒株的ORF4基因进行序列比较,并绘制系统进化树。结果表明,BD株与JXA1、HB-3
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