【摘 要】
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目的:探讨食管癌中医证方启膈散、沙参麦冬汤、通幽汤和补气运脾汤对hEGF刺激的人食管癌EC9706细胞生长的影响,进而研究该证方抑制食管癌细胞生长信号转导的机制.方法:体外正
【机 构】
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河南中医学院中医药分子生物学实验室
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目的:探讨食管癌中医证方启膈散、沙参麦冬汤、通幽汤和补气运脾汤对hEGF刺激的人食管癌EC9706细胞生长的影响,进而研究该证方抑制食管癌细胞生长信号转导的机制.方法:体外正常条件培养食管鳞癌细胞株EC9706细胞,无血清饥饿细胞24h,用200ng/mLhEGF刺激细胞45min后,加入启膈散、沙参麦冬汤、通幽汤和补气运脾汤,通过镜下形态观察、MTT染色、流式细胞技术观察细胞增殖变化情况.取抑制EGF刺激EC9706细胞增殖IC50所用的各方药物浓度处理细胞,用Westernblot方法检测细胞内PLC-γ1和PI3K介导的生长信号通路的蛋白表达和酪氨酸磷酸水平.结果:启膈散、沙参麦冬汤、通幽汤抑制细胞增殖的IC50值分别为849、1004和1615mg/L,以此浓度干预细胞,可明显抑制细胞生长,阻止细胞进入S期,补气运脾汤对此细胞株无明显抑制作用.在两个生长信号通路中,3方可不同程度地抑制EGFR和PLC-γ1蛋白表达和酪氨酸磷酸化,以及PKCα、MARCKS、PI3K、AKT-1和NF-κBp50蛋白的表达,其中,在PLC-γ1通路中,抑制作用强弱依次是:通幽汤>启膈散>沙参麦冬汤;在PI3K通路中,作用强弱依次是:通幽汤>沙参麦冬汤>启膈散.结论:启膈散、沙参麦冬汤和通幽汤可不同程度地抑制hEGF刺激的EC9706细胞生长.抑制PLC-γ1和PI3K介导的生长信号转导是其抑制EC9706细胞生长的重要机制.
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