评价线粒体ATP敏感性钾通道(mito-KATP)在七氟醚后处理抑制氧糖剥夺-复糖复氧原代大鼠心肌细胞焦亡中的作用。
方法出生48 h内的SD大鼠，体外培养大鼠心室肌细胞并接种于6孔板(2 cm)培养皿或96孔板，采用随机数字表法分为6组(n＝15)：对照组(C组)、氧糖剥夺-复糖复氧组(O组)、七氟醚后处理组(Sev组)、七氟醚后处理＋5-羟葵酸组(SH组)、5-羟葵酸组(H组)和氧糖剥夺-复糖复氧＋5-羟葵酸组(HO组)。心肌细胞氧糖剥夺4 h，复糖复氧24 h进行氧糖剥夺-复糖复氧；复糖复氧后将培养基在2%七氟醚环境下处理1 h进行七氟醚后处理；氧糖剥夺前1 h培养皿中加入mito-KATP阻断剂5-羟葵酸100 μmol/L；C组心肌细胞正常培养。于复糖复氧24 h时收集心肌细胞，采用流式细胞学AlexaFour488(caspase-1 FLICA标记)和TMR red(DNA标记)双标记法确定心肌细胞焦亡率，采用MTT法确定细胞存活率，采用二氯荧光黄双乙酸盐法测定线粒体活性氧(ROS)含量，采用荧光探针JC-1法检测线粒体膜电位(MMP)，采用Western blot法测定IL-1β表达。
结果与C组比较，O组心肌细胞焦亡率和ROS含量升高，存活率和MMP降低，IL-1β表达上调(P<0.05)；与O组比较，Sev组心肌细胞焦亡率和ROS含量下降，存活率和MMP升高，IL-1β表达下调(P<0.05)；与Sev组比较，SH组心肌细胞焦亡率和ROS含量升高，存活率和MMP降低，IL-1β表达上调(P<0.05)；与SH组比较，HO组心肌细胞焦亡率和ROS含量升高，存活率和MMP降低，IL-1β表达上调(P<0.05)。
结论七氟醚后处理抑制氧糖剥夺-复糖复氧原代大鼠心肌细胞焦亡的机制可能与增加mito-KATP开放相关。