【摘 要】
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目的 研究miR-185-5p mimic靶向MAPK14阻碍黑色素瘤A375细胞的侵袭, 迁移和上皮间质转化, 抑制肿瘤生长的影响.方法 采用LipofecamineTM2000分别或同时对A375细胞转染miR-185
【机 构】
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武汉市第一医院皮肤科 武汉市, 430022武汉市第一医院中医科 武汉市, 430022;武汉市第一医院放射科 武汉市, 430022;
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目的 研究miR-185-5p mimic靶向MAPK14阻碍黑色素瘤A375细胞的侵袭, 迁移和上皮间质转化, 抑制肿瘤生长的影响.方法 采用LipofecamineTM2000分别或同时对A375细胞转染miR-185 mimic和pcDNA-MAPK14, 通过RT-PCR与荧光素酶实验验证miR-185-5p与MAPK14的靶向关系; transwell小室和细胞划痕实验分析miR-185-5p过表达对A375细胞侵袭、迁移能力的影响; Western印迹分析miR-185-5p过表达对A375细胞VEGF、 E-cadherin、 N-cadherin水平的影响.构建移植瘤裸鼠模型, 检测30 d时肿瘤重量, RT-PCR分析肿瘤组织中miR-185-5p和MAPK14 的表达量; 免疫组化分析肿瘤组织中Ki67 及VEGF水平.结果 miR-185 mimic能够促进miR-185-5p表达, 抑制MAPK14表达 ( P<0. 05), 荧光素酶报告实验表明miR-185-5p和MAPK14之间存在靶向调控关系. miR-185-5pmimic能够抑制A375细胞的侵袭、迁移能力 ( P<0. 05), 抑制细胞 VEGF、 N-cadherin 水平, 增加 E-cadherin 水平 ( P <0. 05).移植瘤裸鼠模型显示, miR-185 mimic能够明显抑制移植瘤的生长, 上调肿瘤组织中miR-185-5p表达, 下调MAPK14表达, 降低Ki67、 VEGF水平 (P<0. 05).结论 miR-185-5p mimic 靶向 MAPK14 通过阻断细胞的 EMT 机制, 降低Ki67、 VEGF水平, 抑制黑色素瘤A375细胞的侵袭、迁移和肿瘤形成.
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