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目的
研究原核类泛素(Pup)-蛋白酶体系统对分枝杆菌生长活力的影响。
方法分别敲除耻垢分枝杆菌Pup-蛋白酶体系统中pup和蛋白酶体β亚基基因(prcB)。选取待敲除基因的上下游侧翼序列设计引物,构建自杀性载体,靶基因同源序列和菌株基因组发生同源重组后获得基因敲除的菌株。分别连续测定野生型和基因敲除株在正常及低氧和厌氧应激培养条件下的吸光度值,比较菌株生长活力的变化。
结果正确构建敲除pup和prcB基因的突变株,分别命名为△SM-Pup和△SM-prcB。△SM-Pup菌株生长速度快于野生型菌株和△SM-prcB株。prcB基因的敲除对细菌的生长活力没有产生明显的影响。
结论Pup-蛋白酶体系统对耻垢分枝杆菌的生长产生了一定作用,但具体机制仍需要进一步研究探讨。