重组纤溶酶原Kringle 5区基因杆状病毒载体的构建及表达研究

来源 :医学分子生物学杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:fanke26
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目的 克隆人源性纤溶酶原Kringle5 (K5)基因,构建K5分泌型杆状病毒载体,并检测其在肌细胞中的表达。方法 引物中加入前胰岛素原信号肽基因序列,PCR产物经Age Ⅰ和Ace Ⅰ双酶切后装入pFB载体中构建为pFBK5,将其转染肌细胞C2C12,经Western印迹检测重组蛋白的表达并用MTT试验进行初步活性鉴定。结果 成功扩增出了K5基因序列,测序正确,转染了pFBK5的C2C12细胞及上清中均检测到了特异性的14 ku蛋白条带且其对ECV304细胞产生剂量依赖性抑制作用,而转染空载体对照组无相
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