【摘 要】
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目的探讨低温机器灌注保存对大鼠离体肝脏再生能力的影响。方法取SD大鼠12只，采用随机数字表法将大鼠分为静态冷保存组(SCS组)和低温机器灌注组(HMP组，每组6只，获取两组大鼠肝脏，SCS组肝脏在获取后置于4 ℃组氨酸-色氨酸-酮戊二酸溶液(HTK液)中冷保存6 h，HMP组肝脏在获取后门静脉置管并连接于低温肝脏灌注系统保存6 h。保存6 h后，取两组部分肝组织，用100 g/L甲醛溶液固定，用于
【机 构】
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310003 杭州，卫生和计划生育委员会多器官联合移植重点实验室,浙江大学医学院附属第一医院肝胆胰外科,浙江大学医学院附属第一医院肝胆胰外科,310003 杭州，卫生和计划生育委员会多器官联合移植重点
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目的探讨低温机器灌注保存对大鼠离体肝脏再生能力的影响。
方法取SD大鼠12只，采用随机数字表法将大鼠分为静态冷保存组(SCS组)和低温机器灌注组(HMP组，每组6只，获取两组大鼠肝脏，SCS组肝脏在获取后置于4 ℃组氨酸-色氨酸-酮戊二酸溶液(HTK液)中冷保存6 h，HMP组肝脏在获取后门静脉置管并连接于低温肝脏灌注系统保存6 h。保存6 h后，取两组部分肝组织，用100 g/L甲醛溶液固定，用于后续免疫组织化学分析；其余新鲜肝组织置于－80 ℃保存，采用免疫组织化学法进行检测肝组织中ki67和PCNA蛋白的表达，采用蛋白质印迹法检测肝组织中细胞周期蛋白Cyclin D1和Cyclin E1的表达，采用RT-PCR法检测肝组织中细胞增殖相关基因cdc25a、cdk1和cdk6的表达。
结果HMP组中PNCA表达明显，Ki67可见表达，而SCS组中PNCA和Ki67几乎不表达。与SCS组比较，HMP组ki67、PCNA表达明显较高，两组差异均有统计学意义(P<0.05)。HMP组cdc25a和cdk1基因的表达均显著高于SCS组，两组比较，差异均有统计学意义(P<0.05)；HMP组肝组织cdk6的表达仍高于SCS组，但两组差异无统计学意义(P>0.05)。HMP组大鼠肝组织中细胞周期蛋白Cyclin D1和Cyclin E1的表达量均显著高于SCS组，两组比较，差异均有统计学意义(P<0.05)。
结论低温机器灌注保存较静态冷保存能够更好的维持大鼠肝脏的再生能力，有望成为供肝保存的理想方法。
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