【摘 要】
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目的 探讨人参皂苷Rh2(ginsenoside Rh2,G-Rh2)对小鼠黑色素瘤B16细胞的促凋亡作用及其作用机制.方法 培养黑色素瘤B16细胞,将黑色素瘤B16细胞随机分为6组:control、10 mg/mL、20 mg/mL、30 mg/mL、40 mg/mL、50 mg/mL,培养24 h、48 h、72 h后,采用CCK-8法检测不同浓度G-Rh2对B16细胞增殖的影响;采用Annexin V-FITC/PI双染,流式细胞仪检测细胞凋亡率和细胞周期分布情况;采用分光光度法检测Caspase-
【机 构】
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安庆医药高等专科学校,安徽 安庆 246052
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目的 探讨人参皂苷Rh2(ginsenoside Rh2,G-Rh2)对小鼠黑色素瘤B16细胞的促凋亡作用及其作用机制.方法 培养黑色素瘤B16细胞,将黑色素瘤B16细胞随机分为6组:control、10 mg/mL、20 mg/mL、30 mg/mL、40 mg/mL、50 mg/mL,培养24 h、48 h、72 h后,采用CCK-8法检测不同浓度G-Rh2对B16细胞增殖的影响;采用Annexin V-FITC/PI双染,流式细胞仪检测细胞凋亡率和细胞周期分布情况;采用分光光度法检测Caspase-9、Caspase-3蛋白的活性.结果 不同浓度G-Rh2(10 mg/mL、20 mg/mL、30 mg/mL、40 mg/mL、50 mg/mL)作用于B16细胞24 h、48 h和72 h后,与空白对照组比,随给药浓度升高和药物干预时间延长对B16细胞的抑制率均有显著升高,并且呈浓度依赖性和时间依赖性(P<0.05);10 mg/mL、20 mg/mL、30 mg/mL、40 mg/mL、50 mg/mL的G-Rh2作用B16细胞48 h后,凋亡率分别为(9.43±0.23)％、(17.50±0.11)％、(24.14±0.38)％、(38.93±0.59)％,与空白对照组(6.67±0.10)％相比,随着G-Rh2的浓度增加,B16细胞凋亡率可显著增加(P<0.05);细胞周期研究结果表明,与空白对照组相比,G0/G1期细胞增多,由空白对照组(60.64±0.68)增加至40 mg/mL时的(82.88±0.17)％,G2/M期细胞减少,由空白对照组(16.31±0.11)％下降至40 mg/mL时的(7.49±0.69)％,说明G-Rh2可诱导B16细胞周期阻滞于G0/G1期;分光光度法研究表明,G-Rh2可以明显增加B16细胞内Caspase-9、Caspase-3蛋白的活性(P<0.05).结论 人参皂苷Rh2可抑制黑色素瘤B16细胞增殖,诱导其凋亡,其凋亡机制可能与上调Caspase-9、Caspase-3,激活Caspase家族有关.
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