蒙药蜀葵花HPLC指纹图谱及rbcL序列分子鉴定研究

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目的 建立蜀葵花HPLC指纹图谱及rbcL序列DNA条形码(barcoding)分子鉴定方法.方法 色谱柱为Welchrom Column C18(300mm×4.6mm,5 μm),以乙腈-0.1%甲酸溶液为流动相、梯度洗脱,体积流量1.0 mL/min,柱温35 ℃,检测波长365 nm,进样量10 μL;采用“中药色谱指纹图谱相似度评价软件(2012版A版)”进行相似度评价;同时以rbcL为引物,对11份蜀葵花进行PCR扩增并测定序列,运用DNDMAN和MEGA7.0及CodonCode Aligner17.0软件进行分析.结果 建立了11份蜀葵花的HPLC指纹图谱,得到21个共有峰,相似度均大于0.88,并标定了金丝桃苷(7号峰)、槲皮素(15号峰)、芹菜素(19号峰)、山柰素(20号峰)4个成分;rbcL序列扩增和测序成功率100%,测序到的长度500 bp,GC含量为44.10%?44.40%,种内遗传距离0?0.004 0,平均遗传距离0.001 4,变异位点数10个,相似度为99.00%.结论 建立的HPLC指纹图谱方法稳定可靠、rbcL序列DNAbarcoding分子鉴定方法重复性好,可用于蜀葵花的质量控制.
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