应用改良TAIL-PCR克隆黄瓜6PGDH基因上游序列

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运用改良的热不对称交错PCR(thermalasymmetricinterlacedPCR,TAIL—PCR)对黄瓜6-磷酸葡萄糖酸脱氢酶基因(6-phosphogluconatedehydrogenasegene,6PGDH)的上游序列进行了克隆。与最初的TAIL—PCR相比较,主要改进之处有:(1)根据Primer5.0软件计算结果从随机RAPD引物库中筛选出合适的上游引物,低严谨和高严谨反应中的退火温度也分别进行了调整;(2)将热不对称交替反应继续应用到第3轮PCR扩增反应中以提高特异目的条带和减少
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