SFTS病毒感染脾脏网状成纤维细胞系的建立

来源 :中华实验和临床病毒学杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:bluebluewater
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
目的

分离、纯化、培养和永生化小鼠脾脏原代网状成纤维细胞(fibroblastic reticular cells, FRCs),筛选和鉴定永生化的FRCs克隆,证明永生化FRCs可用于SFTS病毒(SFTSV)体外感染研究。

方法

使用磁珠和流式细胞分选等技术分离、纯化和培养小鼠脾脏FRCs;使用SV40永生化FRCs,筛选单克隆并培养50代以上,使用转录组测序(RNA Sequencing, RNA-seq)和激光共聚焦技术对原代和永生化的FRCs进行比较和鉴定;用SFTSV体外感染的永生化的FRCs。

结果

成功得到4个永生化的FRCs克隆;鉴定结果显示Clone02符合FRCs表型,且纯度均达到了99%;转录组测序相关性分析显示Clone02细胞株基因表达与原代FRCs接近;基因表达分析和激光共聚焦实验证实Clone02的表型和原代FRCs相同;SFTSV在MOI值0.5的条件下即可成功感染Clone02细胞。

结论

永生化的FRCs Clone02细胞保持了原代细胞的形态学、免疫学特征,与原代FRCs基因表达谱接近,可被SFTSV体外感染,是一个新的有潜力的SFTSV体外研究的细胞平台。

其他文献
目的探讨Janus激酶2/信号转导子和转录激活子3(janus kinase 2/signal transducer and activator of transcription 3,JAK2/STAT3)参与紫花前胡素(Decursin,Dec)抑制食管鳞癌细胞增殖的潜在机制。方法Dec(20、40、80 μmmol/L)处理EC109细胞48 h后,MTT法检测细胞活性;TUNEL标染凋亡细胞
期刊
期刊
目的探讨HBV相关肝癌的糖酵解及代谢共生情况,为研究肝癌细胞代谢奠定基础。方法收集HBV相关肝癌患者10例,对肝癌及癌旁组织进行免疫组化并检测代谢共生标志物MCT1、MCT4;选用肝癌HLE细胞株,时间梯度组使用无血清基础DMEM培养基,分别缺氧培养6 h、12 h、24 h和48 h,通过Western blott法检测HIF-1α表达;氧浓度梯度组使用无血清基础DMEM培养基,分别在0.2%、
目的探讨肺动脉瓣置换术(pulmonary valve replacement,PVR)手术时机、适应证、人工瓣膜的选择和术后抗凝方案。方法我中心自2006年6月至2017年4月共行PVR 10例,年龄10~46岁,中位年龄22.5岁,通过总结病例资料及文献回顾对上述问题进行探讨。结果10例患者均为先天性心脏病(先心病),其中先心病合并感染性心内膜炎6例,法洛四联症或肺动脉闭锁等复杂先心病矫治术后
HIV-1感染机体后,可作用于血脑屏障(blood brain barrier,BBB)相关细胞,引起其结构和功能异常,这有利于HIV-1入侵中枢神经系统。损伤BBB的分子机制有多种,其中Tat蛋白作为HIV-1反式转录激活因子,可损伤血管内皮细胞、周细胞和星形胶质细胞,降低紧密连接蛋白表达。而且一些化学物质如甲基苯丙胺,可协同HIV-1 Tat蛋白损伤BBB。本文就HIV-1 Tat蛋白对BBB
目的分析乙型肝炎病毒(hepatitis B virus, HBV)(简称乙肝)表面抗原(HBsAg)酶联免疫法(ELISA)检测阴性献血者血液输血存在乙肝病毒(HBV)感染的残余风险,评价其感染状况。方法选择初筛合格的45 551份无偿献血者样本,采用2种不同的ELISA试剂盒进行HBsAg检测,同时三联荧光病毒单人份核酸扩增检测技术(NAT)检测HBV、丙型肝炎病毒和人类免疫缺陷病毒-1,并对
目的乙肝病毒感染的母亲中,很多医生和患者对于母乳喂养仍有疑虑,评价孕期采用核苷类似物进行母婴阻断的HBeAg阳性的免疫耐受期患者,产后停药母乳喂养的安全性。方法2015年12月1日至2017年5月1日,共纳入患者415例,母乳喂养组220例,人工喂养组195例。本研究为前瞻性观察研究,对于HBeAg阳性,HBV-DNA>2*10E+5 IU/ml的患者,孕24~28周开始替比夫定或替诺福韦抗病毒治
目的以病理检查为金标准,评估FibroTouch与FibroScan对慢性乙型肝炎(chronic hepatitis B, CHB)患者肝纤维化分期的诊断价值。方法纳入2014年3月至2017年12月期间于北京友谊医院行肝组织活检术的CHB患者,同时行FibroTouch和FibroScan检测,分析两种检测方法诊断CHB患者肝纤维化分期的硬度值、最佳诊断界值、曲线下面积(the area un
CD80、CD86及其受体CD28和CTLA-4为T细胞功能的发挥提供必需的共刺激信号。病毒感染可能引起CD80或者CD86的表达下调而抑制特异性T淋巴细胞的功能,从而逃避免疫监视;亦有可能导致其表达的紊乱,诱导机体免疫细胞的种类和功能失衡,从而无法有效的清除病毒导致持续的感染和炎症。因此,CD80/CD86:CD28/CTLA-4共刺激途径对于机体维持适度的免疫应答,以及病毒的清除和机体的恢复具