【摘 要】
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将鸭成纤维细胞培养的鸭肠炎病毒(DEV),经超声处理、高速冷冻差速离心后,采用酒石酸钾-甘油非线性密度梯度超速离心,收集病毒蛋白带,3%磷钨酸负染后观察病毒粒子形态.结果表
【机 构】
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四川农业大学,动物疫病与人类健康四川省重点实验室
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将鸭成纤维细胞培养的鸭肠炎病毒(DEV),经超声处理、高速冷冻差速离心后,采用酒石酸钾-甘油非线性密度梯度超速离心,收集病毒蛋白带,3%磷钨酸负染后观察病毒粒子形态.结果表明:病毒粒子主要集中在40%～50%酒石酸钾-甘油缓冲液交界层.电镜下,病毒粒子纯净,具有疱疹病毒典型形态结构,剖面六角,外观轮廓清楚.成熟病毒粒子直径约150～266 nm,病毒囊膜、核衣壳和核心清晰可见;囊膜外层较内层着色略深,且可见尚未形成完整囊膜的柄状拖尾结构.多数病毒粒子以单核衣壳为主,一定数量的病毒具有双核衣壳,偶见三核衣壳,核衣壳直径为100～150 nm,呈现致密圆形、半圆形或马蹄形等类型.在核衣壳外和囊膜之间可见明显的亮晕.核心DNA电子染色较深,集中分布,直径40～65 nm.本文获得的清晰DEV负染超微结构照片,为该病毒结构生物学的研究提供了重要依据.
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