FGF21腺病毒表达载体的构建及鉴定

来源 :广东医学院学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户：tonight000

【摘要】

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目的构建成纤维生长因子21（FGF21）表达载体。方法将FGF21基因克隆到腺病毒穿梭质粒p AdTrack经DH5α感受态菌扩增,Pme I酶切后热激转化到含腺病毒骨架质粒p Ad Easy-1的BJ5183

【作者】

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严莉莉项丽庞实锋段杏华曹定国梁朋张国平丁银润

【机构】

：

广东医学院生物学教研室,广东省惠阳三和医院

【出处】

：

广东医学院学报

【发表日期】

：

2015年1期

【关键词】

：

腺病毒成纤维细胞生长因子基因治疗 adenovirus fibroblast growth factor 21 gene therapy

【基金项目】

：

广东省自然科学基金项目（No.S2012040006272）

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目的构建成纤维生长因子21（FGF21）表达载体。方法将FGF21基因克隆到腺病毒穿梭质粒p AdTrack经DH5α感受态菌扩增,Pme I酶切后热激转化到含腺病毒骨架质粒p Ad Easy-1的BJ5183感受态菌内同源重组,经卡那霉素筛选及Pac I酶切鉴定,并在DH5α菌中扩增得到Ad-FGF21重组腺病毒质粒,再经Pac I酶切线性化后转染到293A细胞包装成重组腺病毒。结果基因测序结果表明成功合成穿梭载体p Ad-Track-FGF21。PCR和酶切鉴定结果证实含FGF21基因的重组腺病毒表达

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