【摘 要】
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目的 通过大鼠视神经夹伤模型,研究小干扰RNA(siRNA)对视网膜神经节细胞(RGC)的保护作用.设计 实验研究.研究对象 SPF级SD大鼠54只.方法 54只SD大鼠随机分为A、B、C三组,每组
【机 构】
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100730,首都医科大学附属北京同仁医院国家药物临床试验机构北京市眼科研究所
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目的 通过大鼠视神经夹伤模型,研究小干扰RNA(siRNA)对视网膜神经节细胞(RGC)的保护作用.设计 实验研究.研究对象 SPF级SD大鼠54只.方法 54只SD大鼠随机分为A、B、C三组,每组18只.均选取右眼为实验眼,左眼为正常对照.在球后2mm处用40 g压力微型视神经夹夹持视神经60 s,做视神经夹伤模型.建立模型后当天,A、B、C三组分别给予玻璃体注射10,μg、20 μg siRNA和生理盐水.视神经夹伤后10天,每组取6只大鼠用荧光金做逆行标记,14天时取标记后的大鼠双眼眼球标本做视网膜铺片并拍摄照片,RGC计数.计算RGC存活率(右眼RGC数/左眼RGC数×100％).每组其余12只大鼠进一步用蛋白印迹法检测视网膜组织中caspase-3蛋白的表达水平.主要指标RGC存活率,caspase-3蛋白的表达水平.结果 A、B、C组RGC存活率分别为53.63％±7.35％、57.86％±6.00％、45.00％±4.37％(F=7.11,P=0.029),其中A组与C组(P=0.025),B组和C组(P=0.002)之间均有显著性差异;A组和B组之间无显著性差异(P=0.24).A、B、C三组视网膜组织中Caspase-3蛋白与内参灰度比值分别为0.20±0.02、0.19±0.02、0.24±0.03(F=9.73,P=0.02).其中A组与C组(P=0.005),B组和C组(P=0.001)之间均有显著性差异;A组和B组之间无显著性差异(P=0.418).结论 小干扰RNA能有效保护大鼠视神经夹伤模型的RGC,提高RGC的存活率.
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