探讨长链非编码RNA(LncRNA)肝癌高表达转录本(HULC)对骨肉瘤细胞放射敏感性的影响。
方法shRNA HULC慢病毒感染骨肉瘤细胞，以qRT-PCR测定干扰效果。以8 Gy X射线照射处理感染shRNA HULC慢病毒的骨肉瘤细胞，MTT、PI单染、Annexin V-FITC/PI双染法分别测定细胞增殖、周期和凋亡变化。Western blot检测细胞中p21、Cyclin D1、C-Caspase-3蛋白水平和胞浆、线粒体中细胞色素C(Cyt-C)蛋白水平。平板克隆实验检测骨肉瘤细胞的放射敏感性。
结果shRNA HULC慢病毒感染可以明显下调骨肉瘤细胞中HULC表达水平。下调HULC或放射处理均可以抑制骨肉瘤细胞增殖[(100.00±9.65)% vs. (71.36±5.27)%、(63.48±5.93)%, t＝4.512、5.585，P<0.05]、阻滞细胞周期[(50.15±5.14)% vs. (62.35±4.22)%、(66.05±5.23)%, t＝3.177、3.756，P<0.05]和诱导细胞凋亡[(2.98±0.23)% vs. (22.61±3.26)%、(26.14±2.81)%，t＝8.898、10.498，P<0.05]，促进细胞中p21、C-Caspase-3蛋白表达并下调Cyclin D1蛋白水平，提高胞浆中Cyt-C蛋白水平并下调线粒体中Cyt-C蛋白水平。下调HULC联合放射对骨肉瘤细胞增殖[(71.36±5.27)%、(63.48±5.93)% vs. (49.32±5.76)%，t＝4.890、2.967，P<0.05]、周期[(62.35±4.22)%、(66.05±5.23)% vs.(77.17±7.54)%，t＝2.983、2.106，P<0.05]、凋亡[(22.61±3.26)%、(26.14±2.81)% vs. (36.21±3.26)%，t＝6.164、4.564，P<0.05]及Cyclin D1、C-Caspase-3、Cyt-C蛋白表达影响作用更大。下调HULC后骨肉瘤细胞放射增敏比为1.432。
结论下调HULC提高骨肉瘤细胞放射敏感性，这可能与协同放射阻滞细胞周期并诱导细胞凋亡有关。