【摘 要】
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目的 获得表达发热伴血小板减少综合征病毒(SFTSV)N端糖蛋白(Gn)的重组人5型腺病毒(Ad5-Gn),鉴定其生物学特性及诱导产生中和抗体的能力。方法 利用AdEasy腺病毒包装系统,构建pAD-Amp-Gn表达载体,转染HEK-293细胞,获得重组腺病毒Ad5-Gn。用Ad5-Gn感染细胞,利用免疫荧光染色和Western印迹鉴定SFTSV Gn的表达水平;将Ad5-Gn病毒注射BALB/c
【基金项目】
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国家自然科学基金(31902308,32170154,82102391,82272335); 山东省自然科学基金(ZR2019QC010,ZR2021MC010);
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目的 获得表达发热伴血小板减少综合征病毒(SFTSV)N端糖蛋白(Gn)的重组人5型腺病毒(Ad5-Gn),鉴定其生物学特性及诱导产生中和抗体的能力。方法 利用AdEasy腺病毒包装系统,构建pAD-Amp-Gn表达载体,转染HEK-293细胞,获得重组腺病毒Ad5-Gn。用Ad5-Gn感染细胞,利用免疫荧光染色和Western印迹鉴定SFTSV Gn的表达水平;将Ad5-Gn病毒注射BALB/c小鼠,观察小鼠行为学并检测特异性中和抗体水平,评价Ad5-Gn的安全性和免疫原性。结果 免疫荧光染色和Western印迹结果表明,Ad5-Gn感染细胞后能检测到SFTSV Gn表达,且大小符合预期。Ad5-Gn不影响小鼠生长,免疫小鼠4周后产生的中和抗体平均效价为1∶341。结论 获得了表达SFTSV Gn的Ad5-Gn候选疫苗,其毒力低且能诱导小鼠产生较高的中和抗体,为进一步研制SFTSV疫苗奠定了基础。
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