枯草芽孢杆菌中性内切β-甘露聚糖酶的纯化及性质

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枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis ) BM9602产生的中性内切β-甘露聚糖酶(endo-β-1,4-D-mannan mannanohydrolase,EC, 3.2.1.78)经硫酸铵分级沉淀、DEAE-纤维素(DE22)离子交换柱层析,得到电泳纯的样品,提纯了45.5倍,收率为5.9%.用SDS-PAGE测得该酶的分子量为35kD.用PAGEIEF测得其等电点pI为4.5.酶反应的最适pH为5 8,最适温度为50℃.该酶在pH6.0~8.0,50℃以下稳定.金属离子Hg2+和Ag+对酶活性强烈抑制.酶对槐豆胶、羟丙基瓜胶、田菁胶和魔芋粉的Km值分别为3.8、14.9、11.3和2.4mg/mL,Vmax值分别为24.5、86.5、38.4和19.8μm0l.min-1mg-1.酶水解甘露聚糖为甘露寡糖(不含单糖).
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