支原体巨噬细胞活化脂肽2经MAPKs和Nrf2途径诱导人单核细胞血红素氧合酶-1产生

来源 :中华微生物学和免疫学杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:dlghk
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目的 探讨支原体巨噬细胞活化脂肽2( MALP-2)能否诱导人单核细胞系THP-1产生血红素氧合酶-1(HO-1),并探讨其可能的调控机制。方法体外培养THP-1细胞,根据实验目的,用不同浓度的MALP-2作用12 h,或一定浓度的MALP-2作用不同时间后,real-time PCR和Western blot分别检测HO-1 mRNA和蛋白的表达;比色法分析 HO-1酶活性情况;采用丝裂原活化蛋白激酶( MAPKs)特异性抑制剂(30μmol/L SB203580、PD98059和SP600125)预处理THP-1细胞30 min后加入5.0 ng/ml MALP-2共孵育细胞,Western blot检测HO-1的蛋白表达。提取MALP-2处理后的核蛋白及胞质蛋白,Western blot检测转录因子NF-E2相关因子2(NF-E2-related factor 2,Nrf2)在细胞核及胞质中的表达情况,并采用Nrf2 siRNA干扰Nrf2表达后,检测Nrf2和HO-1表达情况。结果 MALP-2能以浓度依赖性方式诱导人单核细胞系THP-1表达HO-1 mRNA和蛋白质,同时,HO-1的酶活性也随着MALP-2浓度的递增而增强;30μmol/L MAPK特异性抑制剂SB203580、PD98059和SP600125处理THP-1细胞后,MALP-2诱导HO-1的表达量随之降低;5.0 ng/ml MALP-2能降低细胞质内Nrf2的表达水平,同时增加其细胞核内含量;且转染Nrf2 siRNA 后,HO-1的表达显著降低。结论 MALP-2诱导的HO-1表达受MAPK和Nrf2的调控。

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