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目的 探讨联合应用人脐带间充质干细胞(human umbilical cord mesenchymal stem cells,hUCMSCs)培养上清液与阿莫西林,对烧伤创面分离的金黄色葡萄球菌的抗菌活性。方法 取足月剖宫产健康胎儿的脐带组织分离培养hUCMSCs,选取第3代hUCMSCs分为4组,分别添加0、10、100、1 000 ng/mL脂多糖(lipopolysaccharide,LPS),于培养6、12、24、48 h采用ELISA法测定抗菌肽LL-37含量。取160个血琼脂平板培养基分4组,每组40个。分别于血琼脂平板培养基上涂布金黄色葡萄球菌菌液(对照组、A组)、hUCMSCs培养上清液配制的金黄色葡萄球菌菌液(上清液组、B组)、hUCMSCs培养上清液配制的金黄色葡萄球菌菌液+200 ng/mL鼠抗人LL-37抗体(抗体组、C组)、100 ng/mL LPS预处理hUCMSCs培养上清液配制的金黄色葡萄球菌菌液(预处理组、D组);各组15 min后于培养基中间平贴阿莫西林E-Test药敏试条,培养箱培养7、12、24、48h时每组分别取10个培养基,观察金黄色葡萄球菌的菌落分布情况及阿莫西林的抑菌环大小,读取阿莫西林对金黄色葡萄球菌的最小抑菌浓度(minimal inhibitory concentration,MIC),计算B、C、D组培养7、12、24、48 h时阿莫西林的部分抑菌浓度(fractional inhibitory concentration,FIC)指数并评定协同抗菌效果。结果 培养各时间点,随LPS浓度升高,细胞培养上清液中LL-37含量也逐渐升高,各LPS浓度组间比较差异均有统计学意义(P<0.05)。培养各时间点,各组血琼脂平板培养基中均出现明显抑菌环,呈“彗星拖尾”状,且细菌菌落随时间延长逐渐融合,24 h后抑菌环趋于稳定。各时间点D组抑菌环的短轴直径均显著大于A、B、C组,B组大于A、C组,C组大于A组,差异均有统计学意义(P<0.05);A组阿莫西林对金黄色葡萄球菌的MIC显著大于B、C、D组,C组大于B、D组,B组大于D组,差异均有统计学意义(P<0.05)。培养各时间点阿莫西林的FIC指数C组大于B、D组,B组大于D组。各时间点B、D组FIC指数均<0.5,产生了有效的协同作用;C组在24 h和48 h时FIC指数>0.5,hUCMSCs培养上清液中的LL37中和沉默后,其协同抗菌作用降低。结论 hUCMSCs上清液能够分泌LL-37,且分泌水平随LPS浓度增大而不断提高;hUCMSCs上清液联合阿莫西林协同抗金黄色葡萄球菌,可有效降低阿莫西林用量,中和LL-37后,hUCMSCs上清液的协同抗菌作用明显降低。