【摘 要】
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目的 探讨硫氧还蛋白结合蛋白(TXNIP)/核苷酸结合寡聚化结构域样受体3(NLRP3)通路在乳腺癌发生发展过程中的调控机制.方法 选取2019年9月至2020年6月期间于笔者所在医院行手术切除的15例乳腺癌组织及其癌旁组织标本,通过免疫组化染色法检测其TXNIP及NLRP3蛋白的表达水平.同时选取3种乳腺癌细胞系(MDA-MB231、MCF-7和SKBR3)和正常乳腺上皮细胞系(HMEC),采用蛋白免疫印迹(Western blot)法检测各细胞系中TXNIP及NLRP3蛋白的相对表达水平.另取MDA-
【机 构】
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儋州市人民医院病理科 海南儋州571700
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目的 探讨硫氧还蛋白结合蛋白(TXNIP)/核苷酸结合寡聚化结构域样受体3(NLRP3)通路在乳腺癌发生发展过程中的调控机制.方法 选取2019年9月至2020年6月期间于笔者所在医院行手术切除的15例乳腺癌组织及其癌旁组织标本,通过免疫组化染色法检测其TXNIP及NLRP3蛋白的表达水平.同时选取3种乳腺癌细胞系(MDA-MB231、MCF-7和SKBR3)和正常乳腺上皮细胞系(HMEC),采用蛋白免疫印迹(Western blot)法检测各细胞系中TXNIP及NLRP3蛋白的相对表达水平.另取MDA-MB231乳腺癌细胞系将其分为6组,即空白对照组(正常培养不做任何处理)、TXNIP过表达组(Ad-TXNIP组,转染携带TXNIP过表达序列的腺病毒载体)、Ad-TXNIP阴性对照组(Ad-eGFP1组,转染不含TXNIP过表达序列的腺病毒空载体)、NLRP3过表达组(Ad-NLRP3组,转染含NLRP3过表达序列的腺病毒载体)、TXNIP和NLRP3过表达共转染组(Ad-TXNIP+Ad-NLRP3组,共转染携带TXNIP和NLRP3过表达序列的腺病毒载体)、TXNIP过表达和Ad-NLRP3阴性对照(Ad-eGFP2)共转染组(Ad-TXNIP+Ad-eGFP2组,共转染携带TXNIP过表达序列和不含NLRP3过表达序列的腺病毒空载体),各组细胞转染并培养24 h后,采用CCK-8法检测MDA-MB231细胞的增殖活性;采用TransweU小室法检测MDA-MB231细胞的迁移、侵袭能力;开展裸鼠成瘤实验并检测MDA-MB231细胞在动物体内的成瘤能力;采用Western blot法检测MDA-MB231细胞中TXNIP、NLRP3、增殖标志蛋白Ki-67、凋亡蛋白caspase-1、血管内皮生长因子(VEGF)、NLRP3下游蛋白白细胞介素(IL)-1β、IL-18以及caspase-1前体蛋白(pro-caspase-1)表达情况.结果 与癌旁组织相比,乳腺癌组织中TXNIP蛋白相对表达水平降低(P＜0.05),NLRP3蛋白相对表达水平升高(P＜0.05).与HMEC细胞系相比,MDA-MB231、MCF-7和SKBR3乳腺癌细胞系中TXNIP蛋白相对表达水平降低(P＜0.05),NLRP3蛋白相对表达水平升高(P＜0.05).与空白对照组相比,Ad-TXNIP组及Ad-NLRP3组MDA-MB231细胞中TXNIP、NLRP3、IL-1β、IL-18、pro-caspase-1和caspase-1蛋白相对表达量升高(P＜0.05),Ki-67和VEGF蛋白相对表达量,MDA-MB231细胞增殖活性、侵袭能力、迁移能力和动物体内瘤体质量均降低(P＜0.05).与Ad-TXNIP组及Ad-NLRP3组相比,Ad-TXNIP+Ad-NLRP3组MDA-MB231细胞中TXNIP、NLRP3、IL-1β、IL-18、pro-caspase-1和caspase-1蛋白相对表达量进一步升高(P＜0.05),Ki-67和VEGF蛋白相对表达量,MDA-MB231细胞增殖活性、侵袭能力、迁移能力和动物体内瘤体质量进一步降低(P＜0.05).结论 在乳腺癌组织及乳腺癌细胞系中,TXNIP蛋白呈低表达,NLRP3蛋白呈高表达;二者可相互作用,促进细胞焦亡,进而抑制乳腺癌细胞的增殖、侵袭与迁移.
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