【摘 要】
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目的构建云南个旧人肺鳞癌YTMLC-90细胞cDNA文库.方法从培养的人肺鳞癌YTMLC-90细胞株中提取总RNA,利用经修饰的oligo(dT)引物(含SfiⅠB酶切位点)合成cDNA第一链,同时根据真
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目的构建云南个旧人肺鳞癌YTMLC-90细胞cDNA文库.方法从培养的人肺鳞癌YTMLC-90细胞株中提取总RNA,利用经修饰的oligo(dT)引物(含SfiⅠB酶切位点)合成cDNA第一链,同时根据真核生物mRNA5'端帽子结构特点,利用SMART寡核苷酸(含SfiⅠ A酶切位点)作为cDNA第一链在mRNA 5'端延伸出去的模板,进而以此序列为引物,利用LD-PCR(long-distance PCR)合成双链cDNA,双链cDNA经Sfi Ⅰ(Ⅰ A和Ⅰ B)酶切和过柱分级分离后,
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