【摘 要】
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目的：克隆花生主要过敏原Ara h 8基因,表达并纯化该蛋白,检测其免疫活性。方法：提取花生总RNA,设计特异性引物,RT-PCR克隆花生Ara h 8基因;将反转录的基因连入pMD19-T Simple V
【机 构】
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呼吸疾病国家重点实验室深圳大学变态反应分室
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目的：克隆花生主要过敏原Ara h 8基因,表达并纯化该蛋白,检测其免疫活性。方法：提取花生总RNA,设计特异性引物,RT-PCR克隆花生Ara h 8基因;将反转录的基因连入pMD19-T Simple Vector,提质粒酶切鉴定并测序。将测序正确的片段连入原核表达载体pET-32a（＋）上,并转入BL21（DE3）宿主表达菌中;IPTG诱导表达;通过Ni2＋亲和层析（FPLC）纯化目的蛋白Ara h 8;Western blot检测该重组蛋白的免疫原性。结果：测序结果表明克隆的花生Ara h 8基因
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