【摘 要】
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研究藤黄酸(GA)与肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)联合作用对人结肠癌HT-29细胞的影响。采用TRAIL、GA单独及联合作用的方法诱导HT-29细胞凋亡,MTT法检测细胞增殖的抑制
【机 构】
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扬州市职业大学医学院,江苏省苏北人民医院,扬州大学医学院,
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研究藤黄酸(GA)与肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)联合作用对人结肠癌HT-29细胞的影响。采用TRAIL、GA单独及联合作用的方法诱导HT-29细胞凋亡,MTT法检测细胞增殖的抑制;琼脂糖凝胶电泳法和流式细胞术判断细胞凋亡;通过流式细胞术检测胞浆内的活性氧自由基(ROS)水平;用分光光度法检测Caspase-3、-8、-9相对活性;免疫印迹实验分析c-FLIP、CHOP、DR4和DR5蛋白表达水平。联合应用1μg·m L-1GA 12 h,显著促进40 ng·m L-1 TRAIL对HT-29细胞的生长抑制和诱导凋亡作用;使细胞出现了清晰的、凋亡特有的DNA ladder条带,细胞凋亡率达(45.5±4.9)%;明显升高胞浆内ROS含量;显著提高CHOP、DR4和DR5的表达,分别至对照组的(7.38±0.41)、(5.41±0.60)和(4.85±0.31)倍,使细胞内Caspase-3、-8、-9活性明显升高(P<0.05);下调抗凋亡蛋白c-FLIP表达,仅为对照组的(0.22±0.08)倍。GA可能是通过ROS升高激活内质网应激(ERS)凋亡途径、上调DR4、DR5和下调c-FLIP表达来增敏TRAIL诱导人结肠癌HT-29细胞的凋亡。
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