【摘 要】
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苯丙氨酸羟化酶(Phenylalanine hydroxylase,PAH)具有治疗苯丙酮尿症(phenylketonuria,PKU)的潜在药用价值,而热稳定性和储存稳定性差是限制其应用的重要因素。文中考察了多
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苯丙氨酸羟化酶(Phenylalanine hydroxylase,PAH)具有治疗苯丙酮尿症(phenylketonuria,PKU)的潜在药用价值,而热稳定性和储存稳定性差是限制其应用的重要因素。文中考察了多种保护剂对PAH热稳定性的影响,表明添加10%的甘油可将PAH在50℃处理10 min的酶活保留率提高3.1倍,达到(98.3±0.8)%,同时海藻糖、棉籽糖和甘露醇均能将PAH酶活保留率提高到78%以上。鉴于甘油在临床应用过程中可能出现不良反应,对后3种保护剂进行正交实验,获得最佳复合保护剂组合:2.5 mmol/L甘露醇、1 mmol/L棉籽糖和1.5 mmol/L海藻糖,可将50℃酶活保留率提高3.1倍,达到(99.3±1.2)%。10%甘油和复合保护剂均能显著提高PAH在4、20、37℃的储存稳定性,其中添加10%甘油或复合保护剂使得PAH在37℃下储存半衰期分别延长到129.9 h和237.5 h,比未添加保护剂的分别提高了1.9倍和4.3倍。该结果为PAH在医药领域的应用奠定了基础。
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