【摘 要】
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目的:探讨裂果薯皂苷(SSPH)对人肝癌BEL-7402细胞自噬的影响,并对其分子机制进行初步探究。方法:采用MTT、Western blotting、Lyso-Tracker Red染色、Magic Red Cathepsin B
【基金项目】
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国家自然科学基金(81460620);广西自然科学基金(2014GXNSFDA118025);广西教育厅“药学研究生创新创业教育暨联合培养基地项目”(20170703)
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目的:探讨裂果薯皂苷(SSPH)对人肝癌BEL-7402细胞自噬的影响,并对其分子机制进行初步探究。方法:采用MTT、Western blotting、Lyso-Tracker Red染色、Magic Red Cathepsin B染色、流式细胞仪分析分别检测裂果薯皂苷对人肝癌BEL-7402细胞增殖、自噬和凋亡的影响。结果:裂果薯皂苷可抑制BEL-7402细胞增殖并诱导细胞凋亡,同时可抑制细胞自噬,引起自噬标志性蛋白LC3-Ⅰ转变为LC3-Ⅱ,p62蛋白表达无明显变化;加入溶酶体抑制剂氯喹后,裂果薯皂苷未能进一步提高用氯喹处理的细胞中的LC3-Ⅱ水平。Lyso-Tracker Red染色、Magic RedCathepsin B染色及Western blotting检测结果表明,裂果薯皂苷可阻断自噬体-溶酶体融合,并通过改变溶酶体酸化和下调溶酶体组织蛋白酶的表达来抑制溶酶体蛋白水解活性。利用Earle′s平衡盐溶液(EBSS)饥饿处理细胞后,裂果薯皂苷诱导的细胞凋亡进一步增加。结论:裂果薯皂苷可抑制自噬并诱导细胞凋亡,饥饿显著增加人肝癌BEL-7402细胞对裂果薯皂苷诱导的细胞凋亡的敏感性。
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