目的研究比较霍山石斛与美花石斛多糖柱前衍生高效液相色谱(HPLC)特征图谱的差异。方法以盐酸水解石斛多糖,水解产物加入1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮(PMP)进行衍生化,采用HPLC法分析单糖的衍生物。色谱柱为Kromasil 100-5 C18(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相为乙腈-0.02 mol·L-1的乙酸铵溶液(冰乙酸调p H=6.7),梯度洗脱;检测波长为250 nm;柱温为30℃;流速为1 m L·min-1。采用国家药典委员会中药色谱指纹图谱相似度评价系统软件(2004A版)生成对照图谱。结果 10批霍山石斛多糖柱前衍生特征图谱标示出6个特征峰,主要由D-甘露糖(71.8%)与D-葡萄糖(27.2%)组成,D-甘露糖与D-葡萄糖峰面积比值为2.05~3.71,此外含微量的D-半乳糖醛酸、D-半乳糖、D-木糖、D-阿拉伯糖。10批美花石斛多糖柱前衍生特征图谱亦标示出6个特征峰,主要为D-甘露糖(42.9%)与D-葡萄糖(54.0%)组成,D-甘露糖与D-葡萄糖峰面积比值为0.67~0.98,此外含微量的D-半乳糖醛酸、D-半乳糖、D-木糖、D-阿拉伯糖。与对照图谱比较,10批霍山石斛、美花石斛的相似度分别为0.994~1.000,0.934~1.000,霍山石斛与美花石斛共有模式之间的相似度为0.871。结论该方法准确可靠,重复性好;两种石斛多糖构成差异较大,不宜混用。