【摘 要】
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目的 对实时荧光定量PCR（qPCR）法检测重组Ⅲ型人源化胶原蛋白冻干纤维中的外源性DNA残留量进行探究和分析，确定该方法用于DNA质量控制的可行性。方法 采用宿主细胞残留DNA样本前处理试剂盒（磁珠法）提取DNA，利用E.coli残留DNA检测试剂盒（PCR-荧光探针法）进行扩增反应，绘制标准曲线，建立重组Ⅲ型人源化胶原蛋白冻干纤维中外源性DNA残留量的qPCR检测方法。结果 对8批重组Ⅲ型人源
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目的 对实时荧光定量PCR（qPCR）法检测重组Ⅲ型人源化胶原蛋白冻干纤维中的外源性DNA残留量进行探究和分析，确定该方法用于DNA质量控制的可行性。方法 采用宿主细胞残留DNA样本前处理试剂盒（磁珠法）提取DNA，利用E.coli残留DNA检测试剂盒（PCR-荧光探针法）进行扩增反应，绘制标准曲线，建立重组Ⅲ型人源化胶原蛋白冻干纤维中外源性DNA残留量的qPCR检测方法。结果 对8批重组Ⅲ型人源化胶原蛋白冻干纤维进行测定，外源性DNA残留量在0.03～300 pg/μl内，重复性良好，均远低于每剂10 ng，线性良好（R2＞ 0.99），回收率均在50%～150%之间。结论 该方法可用于重组Ⅲ型人源化胶原蛋白冻干纤维中外源性DNA残留量的定量测定。
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