【摘 要】
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根据人纤溶酶原的cDNA序列,利用PCR技术获得人纤溶酶原Kringle5结构域的基因,并将其克隆至表达质粒pET25b(+)中.重组载体pET25b(+)/kringle5转化至大肠杆菌BL21(DE3)中,经IPT
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根据人纤溶酶原的cDNA序列,利用PCR技术获得人纤溶酶原Kringle5结构域的基因,并将其克隆至表达质粒pET25b(+)中.重组载体pET25b(+)/kringle5转化至大肠杆菌BL21(DE3)中,经IPTG诱导表达,在12kD处可见明显的表达条带,表达产物大部分以无活性的包涵体形式存在.包涵体经过体外变复性,SP-SepharoseFF离子交换柱一步纯化,15%SDSPAGE鉴定考染一条带,纯度达95%以上.所得到的目标蛋白能明显的抑制bFGF诱导的牛毛细血管内皮细胞增生.
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