辣根过氧化物酶同工酶C基因在巴斯德毕赤酵母中的克隆与鉴定

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目的:克隆辣根过氧化物酶同工酶C基因,为此基因的表达作准备.方法:用PCR方法从辣根的总DNA中扩增得到一种辣根过氧化物酶同工酶C基因HRPC2,通过PCR的方法去除内含子后连接到pMD18-T载体上,测序证明正确后,用限制性内切酶切下目的基因,插入到巴斯德毕赤酵母表达载体pPIC9K中,构建成重组质粒pC2EX9K.再将辣根过氧化物酶同工酶C基因在毕赤酵母中进行克隆、鉴定.结果:重组质粒pC2EX9K转化毕赤酵母后,经PCR鉴定,证明形成了目的基因的克隆.结论:应用毕赤酵母作为受体菌,pPIC9K为载体
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