【摘 要】
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目的构建丙肝病毒核心基因克隆载体pGEM-HCV/core,为进一步研究外部引导序列(external guide sequence,EGS)引导核糖核酸酶P在RNA水平阻断丙肝病毒核心基因的表达做好前期基
【基金项目】
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广州市科技局基金资助项目(2005J1-C0291)
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目的构建丙肝病毒核心基因克隆载体pGEM-HCV/core,为进一步研究外部引导序列(external guide sequence,EGS)引导核糖核酸酶P在RNA水平阻断丙肝病毒核心基因的表达做好前期基础。方法将含HCV全长基因的pBRTM/HCV1-301l质粒于大肠杆菌JMl09内扩增;提取pBRTM/HCV1-301l质粒;从pBRTM/HCV1-301l质粒中PCR扩增出HCV核心基因片段并将其插入pGEM-3Z克隆载体;以得到重组的pGEM-HCV/core克隆载体;最后EcoR I and Hind III双酶切鉴定HCV核心基因克隆载体。结果pGEM-HCV/core克隆载体经双酶切、凝胶电泳证明插入片段与HCV核心基因片段大小相符;经测序证明其插入序列与HCV core基因序列一致。结论成功构建了HCV核心基因的克隆载体pGEM-HCV/core。
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