SPE-HPLC法测定马破伤风免疫球蛋白F(ab’)2中Triton X-100残留量

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目的:建立固相萃取高效液相色谱(SPE-HPLC)法测定马破伤风免疫球蛋白F(ab’)2中灭活剂Triton X-100的残留量。方法:采用Oasis固相萃取小柱对样品进行预处理,以水和5%甲醇为淋洗剂,以甲醇为洗脱剂,收集甲醇洗脱物用于HPLC分析。采用ZORBAX Extend-C18色谱柱(4.6 mm×150 mm,5μm),流动相为甲醇-水(80∶20),流速1.0 mL·min-1,检测波长230 nm,柱温30℃,进样量10μL。结果:Triton X-100浓度在0.56~55.34μg·mL-1范围内,与峰面积线性关系良好(r=0.9998);检测限(S/N=3)为2.03 ng,定量限(S/N=10)为4.06 ng;提取回收率为91.8%。结论:本方法操作简便、准确、重复性好,可用于Triton X-100的残留量测定。
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