利用温控载体构建碱性果胶酯裂解酶工程菌

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【摘要】

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从筛选出的Bacillus subtilis WSHB04-02菌株中扩增出编码碱性果胶酯裂解酶的结构基因PL，将其插入载体pET22b（＋）多克隆位点，得到带有前导序列PelB重组质粒pET22b（＋）PL。以pET22b（＋）PL为

【作者】

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诸葛斌堵国成沈微诸葛健陈坚

【机构】

：

江南大学生物工程学院环境生物技术研究室工业生物技术教育部重点实验室

【出处】

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微生物学报

【发表日期】

：

2006年4期

【关键词】

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碱性果胶酯裂解酶 pHsh 基因表达 Pectate lyase pHsh Gene Expression

【基金项目】

：

国家“863计划”（2003AA322050）

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从筛选出的Bacillus subtilis WSHB04-02菌株中扩增出编码碱性果胶酯裂解酶的结构基因PL，将其插入载体pET22b（＋）多克隆位点，得到带有前导序列PelB重组质粒pET22b（＋）PL。以pET22b（＋）PL为模板扩增出带前导序列的碱性果胶酯裂解酶的结构基因PL，将其插入温控载体pHsh，重组载体在大肠杆菌JM109中得到表达。其表达量与以，Ⅳ为启动子的重组菌B121DE3[（pET22b（＋）PL]相比，表达量相近。SDS-PAGE分析显示表达产物的分子量均为43kDa，同核酸

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