【摘 要】
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为了研究无翅基因相关整合位点2(Wnt2)在绵羊毛囊发育中的作用,通过CRISPR/Cas9系统介导的基因编辑技术在绵羊原代皮肤成纤维细胞中敲除Wnt2基因,经T7E1酶切试验进行敲除结果
【机 构】
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中国农业科学院羊育种工程技术研究中心/中国农业科学院兰州畜牧与兽药研究所;
【基金项目】
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国家自然科学青年基金(31402057);中国农业科学院细毛羊资源与育种创新工程(CAAS-ASTIP-2015-LIHPS-03);国家绒毛用羊产业技术体系分子育种岗位(No.nycytx-40)
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为了研究无翅基因相关整合位点2(Wnt2)在绵羊毛囊发育中的作用,通过CRISPR/Cas9系统介导的基因编辑技术在绵羊原代皮肤成纤维细胞中敲除Wnt2基因,经T7E1酶切试验进行敲除结果验证,实时荧光定量PCR分析Wnt2、E-钙黏蛋白(CDH1)、半光天冬氨酸酶3(Caspase3)和成纤维细胞生长因子5(FGF5)在敲除后的表达量变化。结果显示:绵羊原代皮肤成纤维细胞中Wnt2基因敲除成功,编辑效率约14.35%;Wnt2相对表达量极显著下调(P<0.01),CDH1相对表达量极显著上调(P<0.01),Caspase3及FGF5表达上调显著(P<0.05)。结果表明:Wnt2基因对毛囊的生长发育具有促进作用。
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