论文部分内容阅读
目的:研究人cTnⅠ基因在大肠杆菌中的融合表达和纯化。方法:以pCOMb3—cTnⅠ为模板,用PCR方法得到了编码该蛋白的基因,进一步将该基因克隆到中间载体pUCm—T,再酶切得到cTnⅠ基因插入到pKL载体中,构建成表达质粒pKL—cTnⅠ。在BL21细胞中经IPTG诱导表达,利用载体携带6×His纯化标签,以His Trap Kit纯化重组蛋白,并进行免疫活性测定。结果:融合蛋白在大肠杆菌中得到高效表达,并用His Trap Kit成功纯化目的蛋白。ELISA分析证实该重组蛋白具有与天然心肌