【摘 要】
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本研究旨在建立一种基于免疫磁珠进行分离、富集和净化前处理，检测鸡肉、鸡肝和鱼肉中氟喹诺酮类药物残留的间接竞争酶免疫吸附试验（indirect competitive enzyme-linked immunosorbent assay， icELISA）的研究方法。通过对合成免疫磁珠及免疫磁珠净化过程中单克隆抗体添加量、偶联时间、缓冲液pH、抗原添加量、抗原捕获时间、温度及包被条件等进行优化，初步建
【机 构】
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中国农业大学动物源性食品安全检测技术北京市重点实验室
【基金项目】
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国家重点研发计划（2018YFC1602301-4）； 国家自然科学基金（31972738）；
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本研究旨在建立一种基于免疫磁珠进行分离、富集和净化前处理，检测鸡肉、鸡肝和鱼肉中氟喹诺酮类药物残留的间接竞争酶免疫吸附试验（indirect competitive enzyme-linked immunosorbent assay， icELISA）的研究方法。通过对合成免疫磁珠及免疫磁珠净化过程中单克隆抗体添加量、偶联时间、缓冲液pH、抗原添加量、抗原捕获时间、温度及包被条件等进行优化，初步建立了基于免疫磁珠净化的icELISA检测方法。结果显示：1)在1 mg的磁珠中，沙拉沙星（sarafloxacin， SAR）单克隆抗体最佳偶联量为15 μg，偶联时间60 min，pH为4.4；2)最佳抗原添加量为1 ng·mL-1，捕获时间40 min，缓冲液为0.01 mol·L-1 PBS，IC50为0.73 ng·mL-1 ，线性范围为1.0～3.2 ng·mL-1；3)氟喹诺酮类药物在鸡肉、鸡肝、鱼肉的检测限均不超过1.33 μg·kg-1 、2.17 μg·kg-1、2.31 μg·kg-1 ，回收率为76.83%～98.70%，批内变异系数批间变异系数均不超过15%，经验证，鸡肉样本检测结果与高效液相色谱法（HPLC）结果一致。结果提示，与传统仪器检测方法相比，该方法提高了检测氟喹诺酮类药物的简便性、选择性以及检测效率，为氟喹诺酮类药物的残留检测提供了新思路。
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