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目的
观察上皮细胞黏附分子（EPCAM）阳性的正常成体小鼠肝祖细胞转化为多项分化潜能的肝干细胞，并探讨HBx蛋白对肝干细胞的影响。
方法改良型两步灌流法消化肝组织，差异性离心法联合密度梯度离心法筛选肝祖细胞；在表皮生长因子和胶原蛋白作用下，观察肝祖细胞向肝干细胞转化，并经细胞免疫荧光法鉴定干细胞中CD133、EPCAM、CD49f及细胞角蛋白19表面标志物的表达情况。添加二甲基亚砜,过碘酸雪夫氏染色、细胞免疫荧光、流式细胞术检测干细胞向肝细胞和胆管上皮细胞分化情况。转染HBx蛋白后，PCR检测细胞转染效率，并观察HBx转染后干细胞形态学差异性及其增殖能力。两组间数据比较采用t检验。
结果肝祖细胞存活率为78.67%±4.04%，在表皮生长因子和胶原蛋白作用下，铺路石样贴壁生长的肝祖细胞中部分细胞聚集成细胞球，具有干细胞样性质，高表达CD133、CD49f、细胞角蛋白19,低表达EPCAM。在二甲基亚砜作用下，能够向肝细胞和胆管上皮细胞分化。HBx转染后肝干细胞能维持干细胞形态，克隆能力增强。
结论EPCAM阳性的正常成体小鼠肝祖细胞能够向肝干细胞转化，同时HBx蛋白对维持肝干细胞的稳定性、促进增殖有重要作用。